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本试剂盒操作简单快速、提取量高。整个提取过程不超过10分钟，不需要离心收集细菌和重悬菌体，直接在培养好的菌液中加入独特的超强裂解液Buffer L2，随后中和、离心过柱，提取出的质粒可高达30μg，并最大限度去除蛋白质、基因组等其它杂质。提取出的质粒DNA可直接用于细菌转化、酶切、PCR、体外转录、测序等其它下游实验。

• 本试剂盒可在干燥、室温（15～30℃）环境下保存1年，如需保存更长时间可将离心柱置于2～8℃。
  
• 第一次使用前，将RNase A溶液全部加入到Buffer N3中，混匀，置于2～8℃保存。
  
• 第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer PW中加入无水乙醇。
  
• 使用前若Buffer L2有沉淀，请置于37℃水浴中不断混匀直至溶液变澄清方可使用。

• 取600μL细菌培养液到1.5mL离心管(自备)中。
  
• 向上述离心管中加入100μL Buffer L2，温和地上下颠倒溶液8次，溶液应由浑浊变为澄清的紫色，表明裂解完全。裂解时间不应超过2分钟。
  
• 向上述离心管中加入350μL Buffer N3(请先检查是否已加入RNaseA)，立即上下颠倒约8～10次充分混匀，此时溶液应完全变为黄色并有黄色沉淀形成。13000rpm离心2～3分钟。
  
• 将步骤3中所得上清液缓慢倒入已备好的吸附柱吸附柱DM中，避免沉淀进入吸附柱。
  
• 13000rpm离心15秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
  
• 向吸附柱中加入150μL Buffer PB，13000rpm离心15秒。
  
• 向吸附柱中加入400μL Buffer PW(请先检查是否已加入无水乙醇)，13000rpm离心1分钟。
  
• 将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中，向吸附膜的中间部位加入30～100μL Buffer EB，13000rpm离心1分钟，收集质粒DNA,-20℃长期保存。

• 本试剂盒提取菌液可多至3mL，若提取的菌液量＞600μL时，需先将超出600μL的菌液13000rpm离心30秒(收集菌体)，弃上清后再加入600μL菌液，将管底的菌体彻底重悬后接下面操作。
  
• 向上述离心管中加入100μL Buffer L2，温和地上下颠倒溶液10次，若溶液不澄清，需继续颠倒混匀，直至溶液变为澄清的紫色，裂解时间不应超过2分钟。(若溶液仍有浑浊现象说明菌体量过大，需适量减少菌体量。)
  
• 向上述离心管中加入350μL Buffer N3(请先检查是否已加入RNaseA)，立即上下颠倒充分混匀，直至紫色溶液完全变为黄色并有黄色沉淀形成，方可进行下一步操作。13000rpm离心5分钟。
  
• 将上清转移到新的离心管中，加入200μL异丙醇，上下颠倒混匀数次，混匀后转入吸附柱DM中，由于溶液量过大，此时需分两次过柱离心，13000rpm离心15秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
  
• 向吸附柱中加入150μL Buffer PB，13000rpm离心15秒。
  
• 向吸附柱中加入400μL Buffer PW(请先检查是否已加入无水乙醇)，13000rpm离心1分钟。
  
• 将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中，向吸附膜的中间部位加入50～200μL Buffer EB，室温放置2分钟，13000rpm离心1分钟，收集质粒DNA,-20℃长期保存。